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葡萄糖氧化酶(GOD)是一种需氧脱氢酶,能专一地氧化β-D-葡萄糖成为葡萄糖酸和过氧化氢,在有过氧化氢酶存在的情况下,生成葡萄糖酸和水,并在此过程中消耗氧气。经旋光测定,GOD反应的*初产物不是葡萄糖酸,而是中间产物δ-葡萄糖酸内酯,而后δ-葡萄糖酸内酯以非酶促反应自发水解为葡萄糖酸。
1 葡萄糖氧化酶(GOD)的特性
高纯度葡萄糖氧化酶为淡黄色粉末,易溶于水,分子量为150KD左右,*大光吸收波长为377nm和455nm。葡萄糖氧化酶的作用温度为30℃~60℃,固体酶制剂在0℃下保存至少可稳定2年,在-15℃下可稳定8年。葡萄糖氧化酶稳定的pH范围为4.0~8.0,具有很好的稳定性。一般来说,酶反应受底物浓度的影响不大。葡萄糖浓度在5%~20%,反应速度几乎不变。
2 葡萄糖氧化酶的作用机理
葡萄糖氧化酶作为一种新型的绿色添加剂有其独特的作用方式。与普通酶制剂不同,它并不是通过改善营养素的消化利用和减轻抗营养因子的方式来改善对动物生产性能的影响。其方式可能是一方面通过与饲料中葡萄糖作用而产生的葡萄糖酸来发挥作用,另一方面,葡萄糖氧化酶在与葡萄糖作用过程中消耗氧气,使消化道更易形成厌氧环境,促进厌氧有益菌的增殖。综合起来葡萄糖氧化酶通过在肠道中的作用可能起到酸化剂和益生菌的作用。
葡萄糖酸是一种有机酸,它能够降低肠道pH值,提高饲料的酸结合力,增殖有益菌,抑制有害菌,并且低的pH值可以促进肠道蠕动,提高营养物质的利用率。G.Biage等(2006)通过体外和体内试验报道了葡萄糖酸在仔猪上的应用,体外试验显示,经过4h、8h、24h的发酵试验,盲肠液中的氨显著减少;发酵24h后,总脂肪酸、乙酸、丙酸、n-丁酸、乙酸丙酸比、乙酸+丁酸与丙酸比都极显著的增加。
饲养试验结果表明,与对照组相比,葡萄糖酸使仔猪的平均日增重分别提高了13%~14%,并且葡萄糖酸增加了空肠的总短链脂肪酸量。即葡萄糖酸可以改善仔猪肠道健康状态,提高其生产性能。葡萄糖酸能够到达大肠,刺激乳酸菌的生长,Takamitsu等(2002)应用葡萄糖酸及与其有相似结构的山梨醇和葡萄糖研究了葡萄糖酸的发酵模式,结果显示,葡萄糖酸较后两者发酵慢,其主要被乳酸菌所发酵并且刺激丁酸盐的产生,葡萄糖酸可能会像益生元一样发挥作用。